CircRNA体外合成与检测服务

新冠疫情的爆发，催化了RNA疗法的蓬勃发展。辉瑞/BioNTech 和 Moderna 新冠 mRNA 疫苗的大获成功，激发了整个科学界对mRNA 疗法的研究。不止mRNA领域，基于环状RNA（circRNA）的RNA疗法也凭借circRNA更稳定的环形结构、更低的免疫原性和更高的蛋白表达量等优势，正在生物医药领域掀起新一波的浪潮，并快速成为产业和资本的热点，mRNA2.0时代已来！

CircRNA概述与优势

环状RNA (circRNA)是一类独特的非编码RNA分子。与传统的线性RNA相比，circRNA是通过反向剪接形成的单链共价闭合环状RNA分子，不具有5‘ 端帽子和3’ 端poly(A)尾巴。CircRNA广泛存在于多种细胞中，并具有丰富的功能，如miRNA海绵、蛋白海绵、蛋白支架、mRNA调节子等。早先认为，circRNA不具有编码蛋白质的能力，但目前研究证明，IRES元件和m6A修饰可以让circRNA成为翻译模板，这为circRNA合成蛋白质开辟了道路。CircRNA的替代优势在于：无需加帽，只需环化；环化利用序列自身的核酶活性，无需引入额外蛋白酶（如加帽酶等）杂质；在细胞内更稳定；表达蛋白半衰期更长；免疫原性更低等方面。

circRNA赛道火种已燃，国内外风起云涌

Orna Therapeutics（简称“Orna”），世界首家利用circRNA开发新疗法的公司。其开发的完全工程化的环形RNA——oRNA，作为一种全新的RNA药物，可以充分发挥RNA的潜力，并有望改变我们治疗疾病的方式。目前，Orna 公布了4条研发管线，分别是原位 CAR-T细胞治疗，杜氏肌营养不良（DMD）基因替代疗法、新冠疫苗，以及一款未公开信息的管线。资本方面，根据新思界产业研究中心发布的《2022年环状RNA(circRNA)行业发展现状及投资策略建议报告》显示，近两年全球环状RNA研究热情再上新高度，其中 2021年，环状RNA领域实现近40亿元的融资规模。2021年2月，Orna 获 8000 万美元A轮融资，用于开发工程化环状RNA药物；同年5月和8月，Laronde 完成5000万美元的A轮融资以及4.4亿美元的B轮融资，成功跃居2021年全球RNA疗法投资领域第二名。2022年8月，默沙东重磅宣布与Orna 签订总额高达36.5亿美元的研发合作协议，共同发现、开发和商业化基于环状RNA的多个研发项目，包括传染病和肿瘤学领域的疫苗和疗法，这意味着环状RNA领域首次进入全球大药企的重点交易范围，并且一步迈上了multi-billion package 的台阶。此外，在国内也有多家创业公司正在推动基于circRNA 的RNA疗法，并完成数亿融资，circRNA 疗法的火热局面已然开启。

抢滩布局！重磅加推circRNA制备和检测服务

维真生物与宜明细胞强强联合，重磅布局 circRNA 领域，现已开发并建立了成熟的科研级 circRNA 生产体系，同时搭建了全流程一站式的 circRNA 制备平台，包括序列设计与优化、体外转录、环化与纯化等。不仅可以为客户提供 circRNA 的定制化合成制备，包括 circRNA 脂质体的制备，还可以提供下游多维度的检测服务，满足客户不同研究领域的需求，助推 circRNA 功能研究，以及 circRNA 疗法和相关药物的研发进展！

1、利用PIE自剪切策略进行circRNA的体外合成

维真生物采用内含子-外显子（PIE）自剪接策略进行circRNA的体外制备。通过将核心序列插入到环化载体，生成用于体外转录（IVT）的模板，产生线性RNA后通过Group I核酶自催化形成circRNA。在RNA环化后用RNase R对未环化的RNA进行消化，使circRNA分离富集，结合HPLC技术获得高纯度circRNA样品。

（Engineering circular RNA for potent and stable translation in eukaryotic cells）

2、微流控技术制备circRNA脂质体

我们采用简便快速，条件温和，并且易于生产放大的微流控技术进行circRNA脂质体复合物（circRNA-LNP）的制备，可为客户提供mg级别的高质量 circRNA-LNP复合物，合成的circRNA-LNP具有批次一致性良好、粒径可控（50-200nm以内），包封效果好等优点，可直接用于体外和体内研究。

3、全方位的表达体系，多维度的检测服务

我们拥有完善的表达体系，可以为客户提供包含报告基因、高灵敏钙离子感受器、基因编辑以及新冠相关基因等在内的全面的circRNA和circRNA脂质体的制备。此外，我们还可以为客户提供多维度的circRNA检测服务，包括但不限于：

1) circRNA完整性检测

2) LNP包装率检测

3) LNP粒径检测

4) 更多定制化检测（可选）

a)残留检测（如 T7-RNApol、DNaseI、RNase inhibitor、dsRNA/DNA/线性RNA等）

b)成环率检测

c)细胞学表达测试

d)动物水平表达测试

4、服务流程

5、技术优势

1、前沿的PIE环化技术，环化率高达80%以上；

2、自有设计的体外转录模板，实现高效稳定表达；

3、严格的生产及质检流程，层层把控，无污染物；

4、资深的研发团队，全方位细节优化，高产高纯度制备；

5、circRNA脂质体微流控包装，包装率高；

6、多种检测及质控方案，品质有保证；

7、快速交付，周期短；

8、提供个性化定制服务。

最后，我们保证制备的 circRNA 纯度高达90%以上，可直接用于细胞转染和动物实验。

6、高产量、高纯度的circRNA质量控制——RNaseR+HPLC

RNaseR富集并经HPLC纯化处理得到高纯度的circRNA

服务咨询方式：

1、维真生物 http://www.wzbio.com.cn/

①热线电话：400-077-2566；

②微信客服（扫描二维码添加维真小助手）

2、宜明细胞 http://www.ubrigene.com/

①热线电话：400-077-2366；