冠状病毒:
是一类主要引起呼吸道、肠道疾病的病原体。冠状病毒由双层脂质的囊膜组成,由于病毒颗粒的表面有许多规则排列的突起,整个病毒颗粒就像一顶帝王的皇冠,因此得名“冠状病毒”。冠状病毒亚科在基因型和血清学上可分为四个属,即α、β、γ和δ冠状病毒。2019-nCoV是目前已知的第七种可感染人的冠状病毒,它与SAS与MERS等一样,都属于β属冠状病毒。
图片来源:知乎
冠状病毒主要包含刺突糖蛋白(Spike glycoprotein,S)、包膜蛋白(Envelope protein,E)、膜蛋白(Membrane glycoprotein,M)以及核衣壳蛋白(Nucleocapsid protein,N)。其中,S蛋白和N蛋白是两个重要的靶点蛋白。
(Geng Li et al,Journal of Medical Virology. 2020)
S蛋白:
S蛋白存在于冠状病毒的刺突之上,位于病毒的最外层,与病毒的传染能力息息相关。根据蛋白结构功能,S蛋白被分成两个功能单位:S1和S2蛋白亚基。其中S1能够促进病毒结合到宿主细胞受体的能力,其含有一个重要的C端受体结合结构(receptor-binding domain,RBD),正是这个位置负责和呼吸道细胞表面的血管紧张素转换酶ACE2识别并结合,病毒由此进入胞内感染人类。——S蛋白是疫苗、治疗性抗体和诊断方法的关键靶标。
N蛋白:
N蛋白是一种核衣壳碱性磷酸化蛋白,位于病毒颗粒的核心部分,N末端存在有一高度保守的序列FYYLGTGP。N蛋白首先是与基因组RNA在胞浆中结合形成螺旋卷曲的核衣壳,并与M、E蛋白相互作用后包裹进入病毒衣壳内,S蛋白在病毒膜出芽成熟时插入,并与M蛋白相用后形成病毒体从囊泡中释放。N蛋白在病毒的包装、复制和蛋白质翻译等过程中起关键作用。作为一种高度保守的抗原蛋白,N蛋白可以用于特异性识别患者样本中的病毒靶点抗原。——N蛋白常作为冠状病毒的检测诊断工具。
ACE2:
ACE2(angiotensin converting enzyme2)中文名称“血管紧张素转化酶2”,是一种膜蛋白,能够参与血压的调节,在肺、心脏、肾脏和肠道中广泛存在。研究发现,新型冠状病毒感染人体细胞的关键在于冠状病毒的S蛋白与人体ACE2蛋白的结合。准确地说,是S蛋白“劫持”了原本是控制血压的ACE2,通过与它的结合入侵人体。——ACE2作为病毒的受体,是新冠病毒侵染人体的关键。
RBD-ACE2-B 0 AT1 复合物结构图
(图片来源于网络)
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2019-nCoV相关基因 |
中文名称 |
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ACE2基因 |
血管紧张素转化酶2 |
过表达质粒/慢病毒/腺病毒/AAV |
干扰质粒/慢病毒/腺病毒/AAV |
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敲降质粒/慢病毒/腺病毒/AAV |
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2019-nCoV-S基因 |
2019-nCoV刺突糖蛋白 |
腺病毒/慢病毒 |
2019-nCoV-N基因 |
2019-nCoV核衣壳蛋白 |
慢病毒/腺病毒/腺相关病毒 |
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pEnter-CMV-ACE2 |
pLent-EF1a-ACE2-CMV-copGFP-P2A-Puro |
pAV-CMV-ACE2 |
pLent-EF1a-ncov-N-CMV-Puro |
pLent-EF1a-ncov-S-CMV-Puro |
pADM-CMV-ncov-N-mCMV-GFP |
pADM-CMV-ncov-S-mCMV-GFP |
pAV-CMV-ncov-N-3flag-P2A-GFP |
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