质粒转染试剂
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一、产品简介:
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二、产品概述：
VGF是一种多聚阳离子聚合物，具有较高的阳离子电荷密度使得聚合物网络在任何 pH下都能充当有效的“质子海绵”(proton sponge)体。这种聚阳离子能将各种报告基因转入各种种属细胞，其效果好于脂质聚酰胺，经进一步的改性后，其转染性能好于树枝状聚合物，而且它的细胞毒性低。
三、使用方法：
大部分细胞系所使用的DNA(µg）与VGF（µg）的比值为1:3或 1:4，转染状态良好的细胞可获得高转染效率、高表达水平和低细胞毒性。下面以24孔板培养的哺乳动物细胞为例：
3.1 贴壁细胞：转染前一天每孔0.5-2×10E5个细胞接种于 500 µL培养基中，在转染时细胞可长至90-95%汇合度。
悬浮细胞：在配制转染液前每孔4-8×10E5个细胞接种于500 µL培养基中。
3.2 转染液制备，每孔细胞用量如下：
A. 用50 µL DMEM培养基 （或其他无血清培养基） 稀释质粒DNA，轻轻混匀。
B. 取适量VGF在50µL DMEM培养基中稀释，室温孵育5min。
C. 将前两步所稀释的DNA和VGF混合，轻轻混匀，室温放置30min。
3.3 在每孔细胞中加入混合后的转染液，轻轻摇匀。
3.4 贴壁细胞可在转染4-6h后可更换培养基，悬浮细胞可在转染后的18-48h之间，对细胞进行换液。转染18-48h之后可检测基因表达。如果检测蛋白表达， 请在转染后24-72h收集细胞样品。
3.5 对于稳定转染，在转染24h后以1:10传代培养，第二天可加入选择培养基。
四、VGF与其他转染试剂的效果：
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