南京医科大学丁颖/孙鹏/苏东明研究团队揭示肿瘤旁腺泡细胞分泌的REG3A加速胰腺癌进展

论文标题：REG3A secreted by peritumoral acinar cells enhances pancreatic ductal adenocarcinoma progression via activation of EGFR signaling

发表期刊：Cell Communication and Signaling（IF 8.2）

合作客户：南京医科大学 丁颖/孙鹏/苏东明教授团队

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WB检测Ad-REG3A在SW1990、PANC-1、AsPC-1、BxPC-3细胞中的过表达效率

研究背景

胰腺导管腺癌（PDAC）是一种致命癌症，5 年生存率不足 10%，缺乏早期诊断手段，预后极差。REG3A 在包括 PDAC 在内的多种恶性肿瘤发展中起作用，但由于其组织定位、受体及下游信号转导机制尚不清楚，REG3A 在 PDAC 中的作用仍存在争议。2025 年 2 月 18 日，南京医科大学丁颖/孙鹏/苏东明研究团队在 Cell Communication and Signaling（IF 8.2）发表题为 REG3A secreted by peritumoral acinar cells enhances pancreatic ductal adenocarcinoma progression via activation of EGFR signaling 的研究论文，证实肿瘤周围腺泡细胞中 REG3A 的表达增加是指示 PDAC 进展的特异性事件，为 PDAC 的诊断和治疗提供了新方向。

研究结果

1、REG3A促进体外和体内PDAC肿瘤生长

通过多种实验和数据分析，研究团队发现肿瘤周围（而非肿瘤组织中）的 REG3A 表达与 PDAC 患者的恶性进展和不良预后相关。进一步研究 REG3A 对体外培养的 PDAC 细胞系的影响，在多种胰腺癌细胞系中，REG3A 表达低于正常胰腺组织和大鼠 AR42J 细胞。通过腺病毒在细胞中过表达 REG3A 后，细胞活力、集落形成、增殖和侵袭能力均增强。利用 PANC-1 或 AsPC-1 细胞构建的裸鼠皮下异种移植模型显示，腺病毒介导的 REG3A 过表达可刺激裸鼠肿瘤生长，且肿瘤组织的增殖率更高。此外，Ad-REG3A 处理能使培养基中 REG3A 浓度呈剂量依赖性增加，且 REG3A 与内质网标记蛋白共定位，去除信号肽后，分泌的 REG3A 明显减少，且 Ad-ΔREG3A 无法刺激 PANC-1 肿瘤细胞生长，表明 REG3A 作为典型分泌蛋白发挥作用。

REG3A促进体外和体内PDAC肿瘤生长

2、EGFR-MAPK激活参与分泌型REG3A对PDAC细胞的增殖作用

用重组人 REG3A（rhREG3A）处理 PANC-1 等多种 PDAC 细胞系，细胞活力、集落形成、增殖和侵袭能力均增强，表明 REG3A 通过旁分泌或自分泌模型促进肿瘤生长。转录组分析表明 REG3A 刺激激活了包括 EGF/EGFR 和 MAPK 在内的致癌信号通路。rhREG3A 处理 PANC-1 细胞，能激活 MAPK 促增殖通路，使 EGFR（Y1068）和下游 ERK 磷酸化，还能诱导 EGFR 二聚化，且与 EGFR 存在共定位，MST 实验证实二者直接结合。随后在原本不表达 EGFR 的 CHO 细胞中转入 EGFR 质粒后，rhREG3A 刺激可激活 EGFR-ERK 通路，而对转染空载体的 CHO 细胞影响较小。计算机模拟分析显示，REG3A 结合 EGFR 胞外区域的 I（L1）和 III（L2）结构域，与 EGF 的经典结合位点相似。删除 REG3A 的 C 型凝集素结构域后，其与 EGFR 的结合明显减弱，且 REG3A 更倾向于识别 EGFR 的胞外区域而非胞内激酶结构域，EGF 可竞争性抑制 rhREG3A 与 EGFR 的结合及下游 EGFR-ERK 的磷酸化。

EGFR-MAPK活化参与REG3A在PDAC细胞中的增殖作用

3、炎症信号刺激的STAT3激活有助于增加瘤周腺泡细胞中REG3A的表达

通过 PySCENIC 分析 REG3A 阳性腺泡细胞簇中激活的转录因子，并结合 mRNA 水平上调的转录因子及与 REG3A 基因启动子区域的结合情况，发现 STAT3 与 REG3A 的上调高度相关。在 CRA001160 单细胞 RNA 测序数据集中，REG3A 阳性腺泡细胞中 STAT3 mRNA 表达更高。免疫染色显示 PDAC 肿瘤周围区域中，REG3A 表达与磷酸化 STAT3 呈显著正相关。此外，STAT3 激活和 IL6-JAK-STAT3 通路富集均证实，激活的 STAT3 可能促进腺泡细胞中 REG3A 的转录；IL6-JAK-STAT3 通路激活与较差的预后相关。体外荧光素酶报告基因实验进一步证实 STAT3 可直接转录激活 REG3A。IL6 可剂量依赖性地刺激 STAT3 磷酸化并增加 REG3A 表达，而 STAT3 抑制剂 Stattic 可抑制 IL6 诱导的 STAT3 磷酸化和 REG3A mRNA 转录。

炎症介导的STAT3激活导致腺泡细胞中REG3A表达上调

研究结论

本研究证实肿瘤周围腺泡细胞中 REG3A 表达增加指示 PDAC 进展，腺泡细胞分泌的 REG3A 通过结合 EGFR 激活下游 MAPK 信号，刺激 PDAC 细胞生长。揭示 REG3A 有望成为 PDAC 诊断的血清和病理标志物，为开发新治疗方法提供了理论依据。

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